315晚會上,央視曝光動物體內的獸藥殘留問題。記者看到,濟南市章丘區(qū)永良獺兔養(yǎng)殖場負責人李老板在給兔子拌飼料時,還要再添加一種黃色粉末狀物質。而這種物質即喹乙醇。
喹乙醇又稱喹酰胺醇,商品名為倍育諾、快育靈,化學名為:2-[N-2-羥基-乙基]-氨基甲酰-3-甲基-喹惡啉-1,4-二氧化物,分子式為:C12H13N3O4,是以鄰硝基苯胺為原料合成的一種**促生長劑,因其具有良好的廣譜**效果和提高畜禽飼料消化率、促生長作用而被廣泛應用于獸藥及飼料添加劑中。但近些年來,很多學者對喹乙醇的毒性重新做了深入系統(tǒng)的研究與評價,認為它是一種基因毒劑和生殖誘變劑,有致突變、致畸作用,并且在動物體內會產生蓄積毒性,可通過食物鏈間接地對人體健康構成威脅,國家規(guī)定飼料中喹乙醇限量應在50~100g/噸。因此,對飼料及飼料添加劑中喹乙醇的檢測非常有必要。
《飼料中喹乙醇的測定 高效液相色譜法(GB/T
8381.7-2009)》,部分內容節(jié)選。
1 范圍
本標準規(guī)定了以高效液相色譜測定飼料中喹乙醇的方法。
本標準適用于配合飼料、濃縮飼料和添加劑預混合飼料中喹乙醇的測定,最低定量限為1 mg/kg,檢出限為0.1 mg/kg。
2 規(guī)范性引用文件
下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內容)或修訂版均不適用于本標準,然而,鼓勵根據本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用于本標準。
GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法(GB/T 6682—2008,ISO 3696:1987,MOD)
3 原理
試樣中的喹乙醇以甲醇溶液提取,固相萃取小柱凈化,反相液相色譜柱分離測定,紫外檢測器檢測,外標法定量分析。
4 試劑和溶液
除非另有規(guī)定,在分析中僅使用確認為分析純的試劑和符合GB/T 6682規(guī)定的三級用水。
警告——喹乙醇對光敏感,應避光操作及使用棕色容器。
4.1 甲醇(色譜純)。
4.2 提取液:甲醇+水=5+95。
4.3 高效液相色譜流動相:甲醇和超純水(采用二元梯度)。
4.4 淋洗液1:0.02 mol/L鹽酸。移取1.67 mL鹽酸定容至1000 mL。
4.5 淋洗液2:0.1 mol/L鹽酸。移取8.33 mL鹽酸定容至1000 mL。
4.6 淋洗液3:甲醇+水=5+95。
4.7 洗脫液:甲醇+水=40+60。
4.8 喹乙醇標準儲備液:準確稱取喹乙醇標準品0.05020 g(含量≥99.6%),于50 mL棕色容量瓶中,超聲溶解,冷卻至室溫,定容至刻度,搖勻,使其溶液濃度為1 mg/mL,儲存于—18℃冰箱中,可使用一個月。
4.9喹乙醇標準工作液:準確標儲備液4.8于容量瓶中,,用洗脫液4.7稀釋,依次配置成濃度為0.1ug/ml,1.0ug/ml,5ug/ml,10ug/ml,20ug/ml;50ug/ml,100ug/ml的標準溶液,現配使用。
5.儀器:
5.1離心機:3500r/min
5.2搖床:搖速可達110r/min
5.3螺口離心管:50ml
5.4超聲波清洗器
5.5微孔有機相濾膜
5.6固相萃取小柱:Oasis HLB 1ML,30mg或性能相當者
5.7固相萃取儀
5.8恒溫振蕩器
6 試樣制備
選取具有代表性的飼料樣品至少500g,四分法縮減至100g.,磨碎,
全部通過0.42mm孔徑篩,混勻,裝入密閉容器中,避光低溫保存,備用。
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固相萃取小柱
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SimplyGreen HLB,1ML/30mg,100/pk
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SimplyLab
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固相萃取儀
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12位
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國產
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喹乙醇標準品
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甲醇中喹乙醇溶液標準物質,有證書,1mL
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國產
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C18色譜柱
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Simpsil 250*4.6mm,5um
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SimplyLab
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附:喹乙醇代謝物相關耗材:
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柱容量200ng
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水產、畜禽組織
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1mL
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喹乙醇代謝物ELISA試劑盒
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靈敏度1μg/kg
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水產、畜禽組織、乳品
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96T/盒
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喹乙醇代謝物相關國標:農業(yè)部781號公告-3-2006 動物源食品中3-甲基喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸殘留量的測定高效液相色譜法:http://m.asramusic62.com/enstyle/file.html
檢測3-甲基喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸檢測用固相萃取小柱推薦:SimplyGreen
MAX, 60mg/3ml,50/pk,貨號:SG02-06003