(1)  樣品信息




 

(2) 樣品前處理方法

2.1樣品酶解處理

準(zhǔn)確稱量2g豬肉基質(zhì)(精確到0.01g)于50mL離心管中，加入0.2mol/L乙酸銨緩沖液(pH＝5.2)6.0mL，再加入β-鹽酸葡萄糖醛苷酶-芳基硫酸酯酶50μL，渦旋混勻，于37℃下避光水浴振蕩16h。

2.2提取

酶解后放置至室溫，渦旋混勻，8000r/min高速離心8min，傾出上清液于另一50mL離心管，用10mol/L 氫氧化鈉溶液調(diào)pH至9.8±0.2，加入乙酸乙酯10mL，渦旋混勻，5000r/min離心5min，取上層有機(jī)相至另一50mL離心管內(nèi)，再用乙酸乙酯10mL重復(fù)萃取一次，合并有機(jī)相，50℃下氮?dú)獯蹈桑?/span>2%甲酸水溶液5mL充分溶解，備用。

2.3凈化處理

1) 取4支MCX固相萃取小柱(150mg/6mL)，4支PCX小柱(150mg/6mL)，并編號(hào)。置于QdauraTM卓睿全自動(dòng)固相萃取儀中，并把上述提取液全部轉(zhuǎn)移至上樣管中。

2) 設(shè)定萃取程序如下：6mL甲醇，6mL 2%的甲酸水活化小柱(流速2mL/min)，上樣管中樣品全部上樣(流速0.5mL/min)。分別依次用2%的甲酸水溶液，甲醇各6mL淋洗固相萃取小柱(流速2mL/min)。淋洗完畢后通入空氣抽干小柱。最后用4%的氨化甲醇6mL洗脫小柱，收集(流速0.5mL/min)。

3) 將洗脫液在50℃下用氮?dú)獯蹈?，殘?jiān)煤ㄈ萑芤?/span>(10%的甲醇水)定容到1mL，充分溶解，并用0.2μm濾器過濾。

(3) 色譜條件

流動(dòng)相：A：0.1%甲酸的水溶液  B：0.1%甲酸的乙腈溶液

流 速：0.2mL/min    進(jìn)樣體積：5μL

色譜柱：Venusil® MP C18  2.1×150mm，5μm，100?

質(zhì)譜儀：API 4000+

離子源：電噴霧(ESI)，正離子模式

掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)

(4) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.1 豬肉基質(zhì)0.5ppb加標(biāo)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：                4.2 豬肉基質(zhì)5ppb加標(biāo)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：


 

4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)論：

對(duì)于豬肉基質(zhì)樣品，PCX與MCX對(duì)8種激動(dòng)劑的回收率相當(dāng)；因?yàn)闆]有內(nèi)標(biāo)校準(zhǔn)，回收率結(jié)果相對(duì)偏低。

(4) 訂貨指南